青蒿琥酯抑制巨噬细胞释放前炎症细胞因子的分子作用机制研究

目的:革兰阴性菌细胞膜上的脂多糖(li-popolysaccharide,LPS)与重症急性胰腺炎(se-vere acute pancreatitis,SAP)的发生发展密切相关.局部和全身单核细胞/巨噬细胞在SAP炎症过程中起着重要作用.青蒿琥酯(artesunate,AS)通过减少前炎症细胞因子的释放来保护重症急性胰腺炎大鼠.本研究进一步探讨AS抗炎作用的分子机制.方法:采用酶联免疫吸附试验研究上清液中前炎症细胞因子的释放水平;实时定量荧光PCR方法检测PI3K-Ⅲ及其信号通路关键分子mRNA的表达.最后,通过免疫印迹法检测PI3K-Ⅲ的磷酸化水平,观察AS发挥抗炎作用的分子机制与PI3K-Ⅲ磷酸化水平之间的联系.结果:与LPS(100 ng/mL)组相比,LPS+AS组能显著抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞释放前炎症细胞因子;LPS+3-甲基腺嘌呤(3-methylade-nine,3-MA)组能显著抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞释放TNF-α.与Medium组相比,LPS组能显著增加小鼠腹腔巨噬细胞中PI3K-Ⅲ及其关键分子的mRNA表达.最后,与LPS(100 ng/mL)组相比,LPS+AS组能显著抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞中PI3K-Ⅲ磷酸化水平的增加.结论:AS的抗炎机制与抑制PI3K-Ⅲ磷酸化水平密切相关.